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胃蛋白酶測定試劑盒 微量法

2024/10/25 9:05:30  作者:索萊寶


胃蛋白酶測定試劑盒 微量法

測定意義:胃蛋白酶由胃粘膜主細胞分泌,分解食物中蛋白質成小肽段。一般用于神經性低酸癥的鑒別,慢性胃炎、慢性胃擴張、慢性十二指腸炎等癥狀時也會引起胃蛋白酶分泌的減少。

測定原理:胃蛋白酶可催化血紅蛋白水解,水解產物與福林試劑反應后顯藍色;一定范圍內,其顏色的深淺與胃蛋白酶活性呈正比。

需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。 

購買鏈接:BC2325 產品規格檢索 (labgogo.com)

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胃蛋白酶測定試劑盒 微量法

1、用石英比色皿  按樣本蛋白濃度計算:活性單位(U)定義:37℃下每毫克蛋白每分鐘催化血紅蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸為一個酶活單位。胃蛋白酶(U/mg prot)=(?A÷?÷d×V 反總)÷(Cpr×V 樣本)÷T = 0.786×?A÷Cpr (2) 按樣本鮮重計算:活性單位(U)定義:37℃下每克組織每分鐘催化血紅蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸為一個酶活單位。胃蛋白酶(U/g)胃蛋白酶(U/g 鮮重)=(?A÷?÷d×V 反總)÷(W×V 樣本÷V 提)÷T =0.786×?A÷W。 Cpr:粗酶液蛋白質濃度(mg/mL),需要另外測定;V 反總:反應總體積,0.22mL;V 提:提取液體積,1mL;T:催化反應時間,10min;V 樣本:加入樣本體積,0.02mL;?:酪氨酸吸光系數,1.4? mol-1·mL·cm-1 ;d:光程,1cm。 2、用 96 孔 UV 板按樣本蛋白濃度計算:活性單位(U)定義:37℃下每毫克蛋白每分鐘催化血紅蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸為一個酶活單位。胃蛋白酶(U/mg prot)=(?A÷?÷d×V 反總)÷(Cpr×V 樣本)÷T = 1.57×?A÷Cpr (3) 按樣本鮮重計算:活性單位(U)定義:37℃下每克組織每分鐘催化血紅蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸為一個酶活單位。胃蛋白酶(U/g)胃蛋白酶(U/g 鮮重)=(?A÷?÷d×V 反總)÷(W×V 樣本÷V 提)÷T =1.57×?A÷W。 Cpr:粗酶液蛋白質濃度(mg/mL),需要另外測定;V 反總:反應總體積,0.22mL;V 提:提取液體積,1mL;T:催化反應時間,10min;V 樣本:加入樣本體積,0.02mL;?:酪氨酸吸光系數,1.4? mol-1·mL·cm-1 ;d:光程,0.5cm。

 

提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。試劑一:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加入 10 mL 試劑二充分溶解。試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃保存。試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 10mL 蒸餾水充分溶解。

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